IPSC培養基(誘導多能干細胞培養基)是用于誘導多能干細胞(iPSCs)生長和擴增的特殊培養基。iPSCs是通過重編程技術將成體細胞(如皮膚細胞或血液細胞)轉化為多能狀態,這種狀態下的細胞具有分化為多種細胞類型的能力。

IPSC培養基的構成:
1.基本培養基
基本培養基通常是標準的細胞培養基,如Dulbecco'sModifiedEagleMedium(DMEM)或KnockOutDMEM/F-12。這些培養基含有細胞生長所需的基本成分,包括氨基酸、維生素、無機鹽等。
2.血清
盡管一些無血清培養基已經被開發出來,但傳統的培養基通常使用胎牛血清(FBS)作為添加劑,提供細胞生長所需的生長因子、激素等。血清的質量和來源對培養基的性能至關重要。
3.生長因子
iPSCs的生長需要特定的生長因子,這些因子能夠促進細胞的自我更新并防止分化。常用的生長因子包括:
-bFGF(基礎成纖維生長因子):促進iPSCs的自我更新,避免其分化。
-LIF(白血病抑制因子):在某些情況下,LIF與bFGF一起使用,特別是在小鼠iPSCs培養中,用于維持其多能性。
-GSK-3β抑制劑:GSK-3β抑制劑如CHIR99021可以促進自我更新。
-TGF-β信號通路抑制劑:這種抑制劑通常用于抑制干細胞的分化。
4.小分子化合物
近年來,科學家發現一些小分子化合物能夠通過靶向信號通路調控iPSCs的生長。例如,抑制Wnt信號通路的化合物可以幫助維持iPSCs的多能性,而通過激活某些通路可以增強細胞的增殖能力。
5.抗生素和抗真菌劑
為了防止細菌、真菌污染,培養基中通常會添加抗生素(如青霉素、鏈霉素)和抗真菌劑(如兩性霉素B)。
IPSC培養基的常見類型有:
1.初代
這種培養基通常用于最初誘導iPSCs的建立,包括使用特定的重編程因子(如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc)對成體細胞進行轉染。初代培養基的組成通常比較基礎,除了基本的營養成分,還會加入一些增殖因子以促進細胞生長。
2.維護型培養基
當iPSCs已經成功誘導出來并進入擴增階段時,維護型培養基就顯得尤為重要。它能夠維持細胞的多能性,避免分化。典型的維護型培養基含有bFGF、LIF以及其他必要的生長因子,能夠在長時間內保證iPSCs的穩定生長。
3.無血清培養基
隨著對iPSC技術的研究不斷發展,出現了一些無血清的培養基。這些培養基去除了血清帶來的不確定性,使用替代成分(如重組生長因子或化學合成小分子)以維持細胞的增殖和多能性。這些培養基在臨床應用中尤其具有優勢,因為它們避免了血清的批次差異和潛在的免疫反應。